    ГЛАВА 5.  АНТИМИКРОБНЫЕ СВОЙСТВА ЭЛЕКТРОАКТИВИРОВАННОГО СВОЙСТВА АНОЛИТА
         Одним из  первых  экспериментов  по изучению свойств анолита были
    эксперименты по выявлению нижнего предела параметров,  при котором на-
    чинают проявляться его бактерицидные свойства.  В качестве тесткультур
    в этом эксперименте были выбраны следующие культуры Микроорганизмов:
         - E.  coli (кишечная палочка) - как наиболее  устойчивый  вид  из
    группы кишечных бактерий;
         - Staphylococcus aureus (стафилококк золотистый) -  как  наиболее
    устойчивый вид из кокковой группы микробов;
         - Bacterium antracoides (антракоид) - один из наиболее устойчивый
    представителей спорообразующих микроорганизмов.
         Бактерицидные свойства анолита определялись по методикам,  наибо-
    лее широко используемым в практике для изучения химико-терапевтических
    и дезинфицирующих средств.
         Для определения  микробных  взвесей  использовали смыв с суточных
    культур стафилококка и кишечной палочки.  Спорообразующая культура ис-
    пользовалась  после суточной инкубации при 37ОС и дальнейшего выдержи-
    вания ее в течение 7-8 суток при комнатной температуре. Спорообразова-
    ние контролировали микроскопией окрашенных мазков.
         Необходимые концентрации  микробных взвесей получали общепринятым
    путем с помощью эталонного бактериального стандарта мутности.
         При постановке опытов,принятых для изучения химикотерапевтических
    веществ, в работе были использованы 3 концентрации микробных взвесей -
    2,5 млрд. микробных тел (1), млн. микробных тел (2) и 500 тыс. микроб-
    ных тел (3),  из них наименьшая (3) соответствовала общепринятой стан-
    дартной концентрации. С целью максимального уменьшения разведения ано-
    лита, микробные взвеси вводили в исследуемый раствор в объеме 0,2 мл.
         Исследовались порции ЭВР-А с величиной ОВП от  плюс  200 мВ  (ис-
    ходной) до плюс 1260 мВ через каждые 100  мВ.  При  этом  величина  рН
    ЭВР-А изменялась пропорционально ОВП. Концентрация  "активного"  хлора
    (С а.х) была не менее 50 мг/л при максимальных параметрах рН  (1,2 ед)
    и ОВП (+1260 мВ). ЭВР-А получали из 0,9% раствора NaCl путем обработки
    его в диафрагменном электролизере "Эсперо-1".
         Все образцы растворов исследовались также на стерильность соглас-
    но инструкции ("Инструкция по бактериологическому контролю консервиро-
    ванной крови, ее компонентов, препаратов." М., 1974).
         Для сравнения испытывали широко применяющейся в медицинской прак-
    тике антибактериальный препарат широкого спектра действия  -  0,5%-ный
    раствор диоксидина, а также дезинфицирующее и антисептетическое средс-
    тво - 0,1 и 0,5%  растворы хлоргексидина биклюконата.  Анолит  начинал
    проявлять бактерицидные свойства с параметром ОВП плюс 500 мВ и рН+4,8
    ед,  при которых ингибировал рост стафилококка и  кишечной  палочки  в
    третьей (стандартной) концентрации.
         Наиболее эффективным  можно  считать  анолит с величиной ОВП - от
    плюс 900 до 1260 мВ и рН - от 3,5 до 1,2 ед.  соответственно, С а.х 50
    мг/л, при воздействии которого получены совпадающие тремя методами ре-
    зультаты по бактерицидному эффекту даже при II-й,  значительно высокой
    концентрации микробных взвесей стафилококка и кишечной палочки.
         Воздействие 0,5% раствора диоксидина и 0,1% раствора хлоргексиди-
    на оказалось слабее - бактерицидное действие их  проявлялось  лишь  на
    минимальной  (Ш-й)  концентрации микробов и не при всех использованных
    методах. По силе биомикробного воздействия анолит с параметрами ОВП от
    + 900 до 1260 мВ и рН лт 3,5 до 1,2 ед. можно сравнить лишь с эффектом
    использования более концентрированного 0,5% раствора хлоргексидина.
         Бактерицидное действие анолита в отношении Ш-й концентрации  про-
    являлось при активности раствора при параметрах ОВП плюс 900 мВ и выше
    и рН= 3,5 ед.  и ниже, а в отношении П-й концентрации при максимальных
    показателей  активности ОВП = + 1150 и 1260 мВ и рН от 1,5 ед.  до 1,2
    ед.  Однако, эти результаты были получены лишь в методах без использо-
    вания  зараженных  тест-объектов - на них растворы оказали споростати-
    ческое воздействие, задерживая рост микроорганизмов на 2-4 суток.
         Таким образом, исследованные растворы с параметрами ОВП +900 мВ и
    выше и рН=3,5 ед. и ниже, С а.х 50 мг/л приводят к гибели стафилококка
    и кишечной палочки при концентрации 400 млн.микробных тел (П) и споро-
    вой палочки при концентрации 400 тыс.  микробных тел (Ш). Наиболее вы-
    сокая  (1)  концентрация микробной взвесии везде давала рост.  Однако,
    при специальных исследованиях, с повторным воздействием растворов (при
    добавлении  свежего раствора к трижды отмытому в физиологическом раст-
    воре осадку) было установлено бактерицидное действие и на 1 концентра-
    цию микробной взвеси.
         Все приведенные  выше данные были получены со штаммами микроорга-
    низмов, наиболее широко используемыми в практике исследования бактери-
    цидных и бактериостатических свойств тел или иных препаратов. Нами бы-
    ли проведены исследования влияния анолита с максимальными  параметрами
    ОВП плюс 1260 мВ и рН равным 1,2 ед. и других тест-штаммах (суспензиях
    суточных агаровых культур музейных штаммов) патогенных  и  сапрофитных
    бактерий:
         1. E.coli сапрофитный штамм.
         2. E.coli 055-патогенный.
         3. Staphylococcus Pyogenis N 1;4.
         4. Staphylococcus epidermidis N 82.
         5. Bacterium subtilis
         6. Shigelloe flexneri
         7. Shigllae sonnei
         8. Salmonellae paratyphi A
         9. Salmonellae typhi murium
         Суточные культуры смывались физиологическим раствором,  и суспен-
    зии их устанавливались по густоте стандарта мутности до 10 ед.  (стан-
    дарт мутности изготовлен гос.  контрольным институтом им. Тарасевича).
    Затем  из полученной суспензии готовились разведения в физиологическом
    растворе до содержания 1 млн.  микробных тел в 1 мл суспензии. В опыте
    использовались 1 мл суспензии,  содержащей 1 млн.  микробных тел. Воз-
    действие анолита на суспензии бактерий продолжалось в  термостате  при
    Т=37ОС  в  течение 1-5-15 мин для установления оптимального срока воз-
    действия анолита на культуры бактерий. Для этого к 1 мл анолита добав-
    ляли 1 мл суспензий бактерий, содержащей 1 млн. микробных.
           Опыты показали,  что рост бактерий отсутствовал при инкубации в
    термостате в течение 1 и более мин ( табл. 5.1).
         После инкубации в термостате,  культуры бактерий (1 мл жидкости +
    анолит) помещали в стерильные чашки Петри и смешивали с 15 мл расплав-
    ленного и остуженного до 45ОС питательного  агара  для  выращивания  в
    термостате  в течение суток.  На следующий день производили учет коло-
    ний,  выросших в чашках. Одновременно с опытом ставился контроль: сме-
    шивали  1 мл суспензии культуры с физиологическим раствором в объеме 1
    мл, инкубировали 15 мин в термостате, а затем 1 мл суспензии помещался
    на чашку Петри, заливался питательным агаром и инкубировался в течение
    суток.  При этом было выявлено, что анолит оказывает бактерицидный эф-
    фект по отношению ко всем вышеуказанным штаммам бактерий,  в то время как
    в контроле был обнаружен рост бактерий.
         Как всякая активированная система,  анолит подвержен процессу ре-
    лаксации, т.е. процессу возвращения в состояние устойчивого термодина-
    мического равновесия.  Процесс релаксации у анолита проявляется в пос-
    тепенной  потере им высоких бактерицидных свойств.  После процесса ре-
    лаксации анолит сохраняет невысокую бактерицидность. В период релакса-
    ции неустойчивые метастабильные соединения в анолите типа HClO перехо-
    дят в устойчивые HCl,(дополнить).. которые и обеспечивают остаточную
    бактерицидность анолита.  Для определения времени активной бактерицид-
    ности анолита были использованы следующие культуры:
         - E.coli  сапрофит;
         - Salmonellae epidermidis;
         - Staphylococcus pyogenes;
         - Bacterium sibtilic
         Все культуры  были использованы в концентрациях 1 млн.  микробных
    тел.  Анолит получали из 0,9% раствора NaCl в аппарате "Эсперо-1". Па-
    раметры анолита были - рН=1,2 ед, ОВП - плюс 1260 мВ, С а.х - 50 мг/л.
         Методика исследований была прежней.
         В результате исследований было выявлено полное  отсутствие  роста
    указанных культур на чашках Петри, при инкубации в течение 2 часов; 24
    часов; 7 суток, 14 суток при условии хранения анолита в герметично за-
    купоренной таре. Начиная с 14 суток отмечался постепенный рост колоний
    на чашках Петри.
         Результаты исследований по установлению времени активного  бакте-
    рицидного действия анолита суммированы в табл. 5.2.

Дом. | Главная | Отзывы