         ГЛАВА 7.  ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ
                   ЭЛЕКТРОАКТИВИРОВАННЫХ ВОДНЫХ РАСТВОРОВ АНОЛИТА
                   ДЛЯ КОРРЕКЦИИ ДИСБАКТЕРИОЗА
         Исходя из данных о высокой бактерицидной  активности  анолита  мы
    решили  проверить  его бактерицидное действие на микрофлору организма.
    Интересно было изучить действие анолита в моделях - состояний, близких
    к  болезням человека.  Для этого была выбрана модель дисбактериоза ки-
    шечника и изучено влияние анолита на микрофлору кишечника (что являет-
    ся важным при пероральном введении препарата).
         Нормальная микрофлора кишечника  представляет  собой  многокомпо-
    нентную  экологическую  систему,  сложившуюся эволюционно в результате
    взаимодействия микроорганизмов и организма - хозяина.  По  современным
    представлениям, нормальная микрофлора ЖКТ подразделяется на индигенную
    и условно-патогенную. Индигенная микрофлора состоит из небольшого чис-
    ла  рядов микроорганизмов,  чье присутствие необходимо для нормального
    функционирования макроорганизма. В микробиоценозе млекопитающих - это,
    прежде всего,  анаэробные микроорганизмы:  Bifidum, Lactobacterium и в
    небольшом количестве ( до 1%  от всех остальных) E.coli  с  нормальной
    ферментативной активностью.
         Последний представитель  индигенной  микрофлоры  отнесен  к  этой
    группе на основании обнаружения его в фекалиях здоровых и огромной по-
    ложительной роли для организма хозяина.  Во всех остальных биотопах он
    рассматривается в группе условно-патогенных бактерий (к которым по су-
    ществу  и  относится)  и  наличие  его расценивается как отрицательный
    признак.
         Представители индигенной микрофлоры учатствуют в механизмах защи-
    ты  организма от экзогенной и эндогенной инфекции,  стимулируют работу
    иммуной системы,  синтезируют ферменты и биологически активные вещест-
    ва,  принимая  тем  самым участие в обменных процессах макроорганизма,
    выполняют детоксикационную функцию и многие другие.
         К группе факультативных бактерий,  наличие  которых  в  кишечнике
    расценивается  как необязательное,и положительная роль которых для ор-
    ганизма пока неясна,  относятся:  эпидермальный и сапрофитный стафило-
    кокк, энтерококки, другие (кроме Е.coli) условно-патогенные энтеробак-
    терии,  споровая анаэробная и факультативно-анаэробная микрофлора.  Ее
    количество в норме ограничивается 102-104 кл/гр фекалий,  кроме эн-
    терококков,  количество которых в норме равно 106-107 кл/гр.  Наиболее
    положительное влияние на функционирование макроорганизма оказывают би-
    фидум и лактобактерии. Они принимают участие в синтезе  витаминов
    и незаменимых аминокислот, предотвращают чрезмерное размножение услов-
    но-патогенной микрофлоры.  Лактобактерии  обладают  иммуномодулирующим
    действием.
         E.coli с  нормальными ферментативными свойствами участвуют в про-
    цессах детоксикации,  обмене холестерина и желчных кислот, синтезе ви-
    таминов.
         Несмотря на относительную устойчивость кишечного  микробиоценоза,
    в нем могут возникать нарушения под действием различных, чаще экзоген-
    ных факторов.  Состояние микробиоценоза  кишечника,  характеризующееся
    снижением  количества  индигенной микрофлоры и (или) повышением услов-
    но-патогенной, называется дисбактериозом. Дисбактериоз может возникать
    как самостоятельное заболевание,  или быть следствием другого. Во вто-
    ром случае дисбактериоз оказывает отрицательное влияние на течение ос-
    новного заболевания, хронизирует его.
         Микробиоценоз толстого  кишечника был изучен у 47 беспородных по-
    ловозрелых крыс,  весом 200-300 гр.  У всех животных был  смоделирован
    алиментарный дисбактериоз кишечника,  10 составили контрольную группу,
    у 37 микробиоценоз кишечника исследовался через 4 и 14 дней после вве-
    дения анолита.
         Анолит получали на диафрагменном электролизере "Эсперо-1" на ос-
    нове 0,9%  раствора NaCl. Параметры вводимого анолита: С а.х < 50 г/л;
    ОВП + 700 мВ; рН = 3,8 ед. Анолит вводился внутрижелудочно в количест-
    ве 2-3 мл 1 раз в день в течение 4 дней (10-15 мл на 1 кг веса). Пара-
    метры  и  количество анолита были подобраны опытным путем.  Содержимое
    толстого кишечника взвешивали, готовили серию десятикратных разведений
    до 10-10  в фосфатном буфере,  из каждого разведения осуществляли мерный
    высев на набор сред:  эндо, кровяной агар, молочно-солевой агар, среда
    Сабуро,  МРС-4 для лактобактерий,  КАБ (для выделения анаэробов). Раз-
    личные микроорганизмы идентифицировали. Количество микроорганизмов вы-
    ражалось  в  lg  от колониеобразующих единиц в 1 гр фекалий (lg /кое /
    гр). Индекс дисбактериоза рассчитывался как отношение условно-патоген-
    ных микроорганизмов к индигенным (в норме = 0,1). Полученные результа-
    ты представлены в таблице 7.1.
         У крыс контрольной группы имел место выраженный дисбактериоз.  Он
    выражался  в  сниженном  количестве  бифидум  и лактобактерий (в норме
    11-12 в lg/кое/гр) и увеличении доли факультативной группы условно-па-
    тогенных микроорганизмов. Значительно выше нормы было содержание клеб-
    сиелл,  споровой микрофлоры,  энтерококков.  Все это нашло отражение в
    индексе дисбактериоза (И.Д = 15,8 при норме И.Д.  < 0,1). После 4 дней
    введения анолита содержание в толстом кишечнике индигенных  микроорга-
    низмов  повысилось на порядок за счет возрастания количества лактобак-
    терий.  Доля условно-патогенных микроорганизмов  уменьшалась  за  счет
    грамм-отрицательных бактерий.  Исчезли клебсиеллы,  псевдонады, гаф-
    нии,  гемолитические кишечные палочки.  Хотя появились  E.coli  лакто-
    за-негативные, осталось высоким содержание споровой палочки. В резуль-
    тате этих изменений индекс дисбактериоза почти нормализовался (И.Д.  =
    0,68).
         Повторный анализ через две недели показал,  что индигенные микро-
    организмы остались почти на том же уровне,  количество бифидум повыси-
    лось на 1,5 порядка, лактобактерии удерживались на том же уровне.

                                                     Таблица 7.1.
                 Микробиоценоз толстого кишечника крыс
                         под влиянием АНОЛИТА

    -------------------------------T---------T------------T--------------
    |      Микроорганизмы          |   До    |После введе-| После введе-|
    |                              | введения|ния анолита | ния анолита |
    |                              | анолита | 4 день     |   14 день   |
    L------------------------------+---------+------------+--------------
           Bifidum                  5,86+-0,5   3,15+-0,31   4,5 +-0,23
           Lacctobacterium sp.     10,8+-0,62   11,7+-0,87   11,5+-0,65
           E.coli                   7,4+-0,24    5,7+-0,64    5,3+-0,71
           Индигенные - всего:-    10,8+-0,61  11,72+-0,37  11,53+-0,72
           E.coli (лактоза)             0      6,78+-0,2         0
           E.coli (гемолиз +)       4,3+-0,34       0         5,6+-0,68
           Streptococcus гр.Д       9,86+-0,6       0        7,85+-0,37
           Streptococcus гр.Д(гемолиз+) 0           0         3,15+-0,4
           Bacillus sp.            10.8+-0,72   11,5+-0,64  10,56+-0,37
           Clostridium sp.              0           0            7,0+-0
           Proteus omibilis        5,76+-0,54    5,6+-0,42       0
           Hafniae sp.               3,0+-0,5       0         3,3+-0,54
           Lersiniae sp.                0        6,3+-0,41     5,3+-0,6
           Klebsiellae sp.         12,0+-0,63       0            0
           Psevdomonae sp.           5,0+-0,4       0            0
           Corynbacterium sp.           0        5,0+-0,34       0
           Общее количество условно-
           патогенных             12,03+-0,74  11,55+-0,67  10.57+-0,68
           Общее кол-во М.О.
           Индекс дисбактериоза       15,8         0,68         0,11
    ---------------------------------------------------------------------
         Количество условно-патогенных микроорганизмов  снизилось  еще  на
    порядок за счет грамм-отрицательной микрофлоры,  по-прежнему в высоком
    титре высевалась споровая палочка.Содержание энтерококков почти  соот-
    ветствовало норме.  Индекс дисбактериоза отражает нормальное состояние
    микробиоценоза кишечника (И.Д. =0,11).
         Из всего  ранее  изложенного следует,  что введение в ЖКТ анолита
    снижает содержание условно-патогенных  грамм-отрицательных  микроорга-
    низмов и увеличивает количество лактобактерий. На споровую грамм-поло-
    жительную микрофлору анолит  действия  не  оказывает.  Многочисленными
    экспериментами нами было выяснено,  что анолит оказывает избирательное
    антибактериальное действие при определенных параметрах,  которые  сос-
    тавляли С а.х.< 50г/л,  ОВП от плюс 600 мВ до плюс 900 мВ, рН от 4 ед.
    до 3,5 ед.
         При повышении параметров анолита до максимальных,  он терял изби-
    рательную активность , вырезая всю микрофлору кишечника за исключением
    споровой грамм-положительной микрофлоры.
         Избирательность антибактериального действия анолита  при  опреде-
    ленных параметрах может быть использована для селективной деконтамина-
    ции кишечника при увеличении в фекальной микрофлоре доли условно-пато-
    генных энтеробактерий.
         Исходя из вышеизложенного,  можно сделать вывод о том, что анолит
    имеет  целый ряд преимуществ по сравнению с применяемыми для этой цели
    антибиотиками, так как не существует антибиотиков с достаточно избира-
    тельным  спектром  действия и вырезая условно-патогенную группу бакте-
    рий, антибиотик повреждает индигенную флору.
         Бактерицидная активность анолита зависит от его параметров,  поэ-
    тому,  зная  или моделируя антибактериальное действие анолита на конк-
    ретные штаммы микроорганизмов in vitro,  можно предсказать бактерицид-
    ную активность анолита на объектах in vivo. Избирательная антибактери-
    альная активность анолита в зависимости от его параметров была с успе-
    хом использована в клинических условиях.

Дом. | Главная | Отзывы