             3.1. Влияние ЭВР на активность некоторых ферментов
         Изучение механизмов медико-биологического действия  "активирован-
    ных систем" включало в себя испытание их действия на различные метабо-
    лические процессы.
         Учитывая,что состояние метаболзма в организме в целом,в различных
    органах и тканях его,  а также на уровне отдельных клеток определяется
    при  прочих  равных условиях состоянием клеточных мембран и активности
    растворимых ферментных систем клетки, в первую очередь изучали влияние
    ЭВР на метаболические показатели,отражающие эти функции.
         В экспериментах in vivo и in vitro изучалось  действие  активиро-
    ванного  физиологического раствора хлористого натрия с потенциалом по-
    рядка +600+1000 мв -600-800 мв. Контролем служили эксперименты с обра-
    боткой соответственно "обычным" физиологическим раствором.
         Эксперименты in vitro
         Из миокарда и других органов получали экстракт на трис-сахарозном
    буфере (рН 714) в соотношении ткань - экстрагирующий  буфер  1:5.Полу-
    ченный экстракт разводили в соотношении 1:100 - 1: :1000 физиологичес-
    ким раствором  (рН  9-12;-600-800мв  -  II),тем  же  (рН  7,0;-400-600
    мв),тем же (рН 2,5-3,0;  +800+1200мв - IV),тем же (рН 7,0; +600+800 мв
    -V). (табл. 3.1)

         рН доводили до 7,3 с помощью р-ра соляной кислоты и едкого натрия
    соответственно.
         В разведенных экстратах определяли активность ферментов различных
    классов,  а  именно:альдолазы  (КФ-4.1.2.7),лактатдегидрогеназы  (ЛДГ)
    КФ1.1.1.27),глютамино-щавелевоуксусной    аминотрансферазы     (ГЩТ,КФ
    2.6.11),глютамико-пировиноградной  аминотрансферазы  (ГПТ,КФ 2.6.1.2.)
    других ферментов.
         (КФ - ключ ферментов согласно Номенклатуре Всемирного биохимичес-
    кого Союза,Москва 1979 г.)

                                                   Таблица 3.1
                 Активность ферментов в Е/г миокарда
     ш1
    --T--------T----------T-----------T-----------T-----------T----------
      |        |     I    |     II    |    III    |   IV      |     V
    пп|Фермент | Контроль | минус 600-| минус 400-|плюс 800 - | плюс 600-
      |        |          | минус 800 | минус 600 |плюс 1200  | плюс 800
      |        |          |    мВ     |    мВ     |    мВ     |    мВ
      |        |          |           |рН 7.1-7.3 | pH 2.5-3.0|  pH 7.0
    --+--------+----------+-----------+-----------+-----------+-----------
    1.Альдолаза 0.40+0.03  0.018+0.001  0.38+0.05   0.32+0.03  0.026+0.002
            р              0.001        0.5         0.05       0.001
    2.  ЛДГ      227+16      0.5+0.03    268+11     0.17+0.02   1.52+0.05
            р              0.001        0.05        0.001      0.001
    3.  ГЩТ      3.1+0.1     0.2+0.01   2.8+0.04    0.1+0.001   0.3+0.05
            р              0.001        0.05        0.001      0.05
    4.  ГПТ     0.6+0.03        0       0.7+0.01       0           0
    ---------------------------------------------------------------------
     ш0

         Результаты показывают,что "АС"с рН 9-12(-мв) и рН  2,5-3,0  (+мв)
    вызывают резкое угнетение активности ферментов вплоть до "0".  При до-
    ведении рН до физиологических значений (7,0-7,3) АС с избыточным отри-
    цательным потенциалом не оказывают ингбирующего значения, а АС с избы-
    точным положительным потенциалом сохраняют ингибирующее  действие  той
    же интенсивности. Следовательно,действие АС (-)рН 7,0 обусловлено сни-
    жением активности фермента в среде с резким отличием  рН  от  оптимума
    для  данного  фермента,а действие АС(+) обусловлено избыточным положи-
    тельным потенцалом и,видимо,связано с конформационными  изменениями  в
    области активных центров ферментов.  В этом случае АС (+) вероятно об-
    ладают универсальным фермент-ингибирующим действием.
         Эксперименты in vivo
         Белым крысам в течение 1 месяца вводили ежедневно  внутрибрюшинно
    АС(+,-) в количестве 5-10мл. Контрольным животным в таком же объеме, в
    те же  сроки  тем  же  способом вводили плацебо -дистиллированную воду
    (табл. 3.2.).
         После умерщвления  животных  общепринятым в биологических экспер-
    ментах методом декапитации собирали кровь и извлекали сердце.
         Путем соответствующей обработки получали сыворотку крови тканевые
    экстракты,  в которых исследовали активность ряда  ферментов:лактатде-
    гидрогеназы             (ЛДГ,КФ1.1.1.27),глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы
    (ГЛ-6ФГД,КФ1.1.1.49),транскетолазы  (ТК,КФ2.2.1.1.),   альдолазы   (КФ
    4.1.2.7),глютамикощавелевоуксусной (КФ2.6.1.1.) и глютамико-пировиног-
    радной аминотрансфераз (КФ 2.6.1.2).
                                                   Таблица 3.2
          Влияние электрообработанной воды на активность некоторых
                             ферментов сыворотки

    --------------------------------------------------------------------
      Фермент           Контроль            АС /+/           АС/-/
    --------------------------------------------------------------------
      ЛДГ (общая)        454 + 2         420 + 20         515 + 14
             р                             0.05              0.05
      ЛДГ (печеночная     78 + 6          77 + 5           91 + 4
           фракция)
             р                               -               0.05
      Альдолаза         5.2 + 0.07       4 + 0.03         5.2 + 0.08
             р                             0.001              -
      ГЩТ                 35 + 1         21 + 0.9         23 + 0.8
             р                             0.001             0.001
      ГПТ                32 + 0.7        18 + 0.5         16 + 0.3
             р                             0.001             0.001
    -------------------------------------------------------------------

         Из представленных данных видно,что при  внутрибрюшинном  введении
    АС  (+) не вызывает существенных сдвигов ферментных констелляций сыво-
    ротки крови по отношению к  контролю,однако  наблюдается  тенденция  к
    снижению ферментных активностей на 8-40%  АС (-) в этих условиях вызы-
    вает активацию одних (ЛДГ) снижение активности других  (ГШТ,ГПТ)  фер-
    ментов.
         В ткани миокарда активность ЛДГ,  Г-6 ФДГ,ГЩГ под влиянием  АС(+)
    не  изменяется,  а  активность  остальных  ферментов  увеличивается на
    21-39% и более.(табл.3.3)

                                                       Таблица 3.3.
               Влияние электрообработанной воды на активность
                             ферментов миокарда

    ----------------------------------------------------------------------
      Фермент           Контроль            АС /+/           АС/-/
    ----------------------------------------------------------------------
      ЛДГ              278 + 16           280 + 11         364 + 20
         р                                 -                0.05
      Г-6 ФДГ           53 + 1             60 + 3            63 + 3
         р                                  0.05            0.05
      ТК               104 + 7            145 + 4           154 + 5
         р                                  0.001            0.001
      Альдолаза       7.8 + 0.5           9.5 + 0.4        9.2 + 0.2
         р                                  0.01             0.01
      ГЩТ             7.2 + 0.2           6.4 + 0.3        7.8 + 0.3
         р                                  0.05              0.05
      ГПТ             1.4 + 0.06          2.6 + 0.08       2.3 + 0.09
         р                                 0.001            0.01
    ----------------------------------------------------------------------
         Под влиянием АС (-) происходит увеличение активности всех изучен-
    ных ферментов.

Дом. | Главная | Отзывы