       2.1. Влияние  электроактивированного раствора,  низкоинтенсивного
            лазерного излучения и их сочетания  на  морфогенез  раневого
            процесса.
         При изучении   влияния  электроактивированного  водного  раствора
    (ЭВР),  низкоинтенсивного лазерного излучения (НИЛИ) и,  в  частности,
    гелий-неонового лазера,  на течении воспалительных и репаративных про-
    цессов в ранах различного типа мы руководствовались классификацией ра-
    невого процесса, предложенный А.Б. Шехтером (1971), в которой различа-
    ют :  1) травматическое воспаление,  2) новообразование соединительной
    (грануляционной)  ткани,  регенерацию эпителия.  3) формирование и пе-
    рестройку рубца.
         Аналогичная классификация и стандартные дерматомные раны площадью
    0,  95 см2,  а также как и набор методик морфологического исследования
    были  использованы  ранее для изучения влияния ГНЛ на раневой процесс.
    Результаты указанных исследований изложены в монографии "Морфологичес-
    кие  основы  низкоинтенсивной  лазеротерапии"  ( Байбеков И.М.,  и др.
    1991) . Это позволяет при сравнении действие ГНЛ и ЭВР на раны не при-
    водить в данном разделе описанные ранее данные.
         Как отмечалось выше,  все эти стадии раневого  процесса,  взаимно
    накладываемые друг на друга.  Они подробно изучены с помощью современ-
    ных методов морфологических исследований,  а результаты обобщены в ра-
    ботах Д.С.  Саркисов с соавт. (1981,1991 и др.), Серова В.В. и Шехтера
    А.Б.  ( 1981) и др.  В связи с этим основное внимание нами уделено тем
    влияниям,  которые  оказывают на раневой процесс электроактивированная
    вода , а комбинации с гелий-неоновым лазером.
         В первые сутки визуального наблюдения раны как контрольных живот-
    ных,  так и орошаемых ЭВР,  облученных ГНЛ и подвергнутых  комплексной
    обработке  ЭВР  с последующим облучением ГНЛ существенно не отличались
    друг от друга.
         Однако уже  на  третьи  сутки отмечается выраженное положительное
    влияние облучения раны площадью 7,2 см2 гелий-неоновым лазером,  обра-
    ботки их ЭВР и особенно комплексного воздействия лазером и ЭВР на тем-
    пы сокращения раневой поверхности.
         Так, в  контрольной группе площадь раневой поверхности была 6,9 +
    0,8 обработанных ЭВР - 3,8 + 0,8, облученных ГНЛ - 3,6 + 0,4, подверг-
    нутых комплексному воздействию - 3,2 + 0,5 см2.  В ранах площадью 0,95
    см2 в эти сроки наблюдения существенных отличий в исследованных  груп-
    пах  не обнаружено,  они наиболее ярко проявлялись на 5 сутки воздейс-
    твия ЭВР ( Рис 2.2,2.3,2.4,).
         Однако светооптические исследования уже через 1 сутки выявили оп-
    ределенные различия состояния ран.  В тканях ран контрольных  животных
    выражены  явления  альтерации  с  преобладанием  эксудативных явлений,
    встречались довольно крупные участки бесструктурных зон.У  контрольных
    животных, как обрабатываемых физиологическим раствором, так и облучае-
    мым красным светом и без  воздействия  на  тканях  ран  преобладающими
    структурами  были  пряди фибрина,  эритроциты ближе к поверхности раны
    распологались нейтрофильные полиморфно-ядерные лейкоциты (ПЯЛ) В более
    глубоких участках раны отмечалось скопление жировых клеток.
         В ранах облученных ГНЛ, бесструктурные зоны эксудата были гораздо
    меньше, плотность клеточной инфильтрации ближе к раневому дефекту была
    выше (Рис 2.5). Наряду с нейтрофильными полиморфно-ядерными лейкоцита-
    ми встречались клетки типа лимфоцитов.
         Схожая картина отмечалась и а  ранах,  обработанных  ЭВР.  В  них
    меньше  отмечалось  прядей фибрина,  доминирующими клетками были ПЯЛ и
    лимфоциты. В глубоких отделах преобладали малодифференцированные клет-
    ки и клетки типа лимфоцитов.  Аналогичная картина отмечалсь и в ранах,
    подвергнутых комплексной обработке. Стереометрические исследования по-
    казали,  что у контрольных животных основной объем (свыше 40%) поверх-
    ностных слоев раны занимали бесклеточные  зоны,  представляющие  собой
    экссудат и фибрин.  У животных,  раны которых подвергались комплексной
    обработке,  объем,  занимаемый бесклеточными  зонами,  был  наименьшим
    (18-19 %).  Значительные отличаи имели место и в относительном объеме,
    занимаемым ПЯЛ. Наибольшее число ПЯЛ отмечалось 1при обработке ран ЭВР
    и  комплексном воздействии.Та же тенденция отмечалась в отношении лим-
    фоцитов,  фибробластов макрофагов (табл.2.1). Однако объем, занимаемый
    последними в тканях ран, был не значителен и не превышал 2%.

                                                    Таблица 2.1.
                ОТНОСИТЕЛЬНЫЙ ОБЪЕМ КЛЕТОК (в%) И БЕСКЛЕТОЧНЫХ
                  ЗОН В РАНАХ ЧЕРЕЗ 1 СУТКИ ПОСЛЕ ДЕРМАТОМИИ

    ---------------------T-----------------------T-----------------------
    Вид воздействия      |    Физ. раствор       |        ЭВР
      Тип клеток         |                       |
    ---------------------+-----------------------+-----------------------
     1. Бесклеточные зоны       40,9+0,91              х 24,3+1,04
      в т.ч. Эндотелиоциты       Р/_0,01                  Р/_0,01

     2. Жировые клетки          15,8+1,48              х 14,2+1,22
                                                          Р/_0,05

     3. Внесосудистые           10,0+0,70             хх 12,4+1,18
        эритроциты                                        Р/_0,05

     4. ПЯЛ                      7,6+0,45             хх 17,3+2,16
                                                          Р/_0,05

     5. Лимфоциты                4,8+0,42             хх  7,1+0,53
                                                          Р/_0,05

     6. Фибробласты              1,8+0,3              хх  4,1+0,59
                                                          Р/_0,05

     7. Макрофаги                0,6+0,22              х  1,4+0,27
                                                          Р/_0,01
     8. Плазмобласты и           4,6+0,76              х  3,5+0,64
        плазмоциты                                        Р/_0,01

     9. Эозинофилы               0,5+0,32             хх  1,7+0,40
                                                          Р/_0,05
    10. Лаброциты                1,3+0,40              х  1,9+0,69
                                                          Р/_0,1
    11. Моноциты и неэтери-
        фицированные кислоты     12,0+158              х  10,7+1,29
                                                          Р/_0,01
    ---------------------------------------------------------------------

    Примечание: В случаях,  отмеченных (х),  критерий Стьюдента использо-
                вался для оценки отличий от нуля средней разности в парах.
                В случаях, отмеченных (хх), использовался критерий знаков

         Сканирующая электронная микроскопия также показала преобладание в
    ранах, подвергнутых ГНЛ облучению, ПЯЛ, лимфоцитов и др, клеток.( Бай-
    беков И.М., 1981, 1991)
         ТЭМ свидетельствует, что в ранах контрольных животных доминирющи-
    ми структурами являются обломки клеток, пряди фибрина с наличием боль-
    шого числа микробных тел как кокков,  так и палочек.В ранах облученных
    ГНЛ,  число микробных тел было несколько меньше так же, как и в ранах,
    обработаных ЭВР.  В ранах подвергнутых комплексному воздействию,  мик-
    робные тельца фактически не  определялись.  Следует  отметить,  что  в
    контрольных группах раны нагнаивались в 68% случаев, в группе облучен-
    ных ГНЛ - 22%  ,  обработанных ЭВР - 11 %,  подвергнутые  комплексному
    воздействию практически не нагнаивались. ПЯЛ в этих ранах были с боль-
    шим числом цитоплазматических отростков,  в их цитоплазме определялись
    различного рода включения,  как секреторные гранулы,  так  и  участки,
    представляющие собой скопления гликогена (рис 2.6). ПЯЛ в ранах, обра-
    ботанных ЭВР и облученных ГНЛ,  содержали фагоцитированные  микроорга-
    низмы в различных стадиях лизиса (рис 2.7).  В контрольных группах ПЯЛ
    также содержали микробные тела,  но последние были без видимых призна-
    ков повреждения, и даже наблюдались делящие микроорганизмы (рис 2.8).
         В этот  период подавляющее число микрососудов ткани раны с расши-
    ренными просветами(рис 2.9). Вокруг сосудов отмечается скопление эрит-
    роцитов и малодифференцированных  клеток  типа  моноцитов  с  довольно
    крупными  ядрами  и  значительным  числом  полисом в цитоплазме.Именно
    клетки такого типа наряду с ПЯЛ наблюдаются мигрирующими  из  просвета
    сосудов в окружающую ткань раны. В ранах, облученных ГНЛ, обработанных
    ЭВР и подвергнутых комплексному  воздействию,  увеличивалось  миграция
    нейтрофильных лейкоцитов и др. клеток через стенку микрососудов.
         В месте миграции ПЯЛ контактирующие участки эндотелиоцитов истон-
    чаются.  ПЯЛ, располагающиеся в просвете расширенных микрососудов, бо-
    лее или менее округлой формы, основную массу клетки составляет сегмен-
    тированное ядро,  секреторные гранулы  немногочисленны.  В  цитоплазме
    мигрировавших  в  окружающую ткань ПЯЛ увеличивается число секреторных
    гранул и др. включений (рис 2.10).
         Ультраструктурные исследования  показали,  что  многие  из клеток
    фибробластического ряда характеризовались невысоким уровнем  дифферен-
    цировки.  Доминирующими структурами в их цитоплазме были полисомы, от-
    дельные профили  зернистой  эндоплазматической  сети.  Довольно  часто
    встречались центриоли (рис 2.11).  Они содержали крупные ядра с  двумя
    или  более ядрышками.Ультраструктура ядер этих клеток свидетельствова-
    ла, что они находятся на разных функциональных стадиях.
         В ядрах одних клеток преобладает гетерохроматин в виде  зернистой
    плотной массы, сконцентированный по периферии ядра у ядерной оболочки.
    Считается, что это малоактивная конденсировааная фаза хроматина. В яд-
    рах  других  клеток  преобладает эухроматин в виде нежной зернистости,
    равномерно распределенной по всей нуклеоплазме.  Это активная  фракция
    хроматина, интенсивно включающий меченный тритием тимидин.
         Через 3 суток обработки дерматомных ран  ЭВР  среди  фибробластов
    преобладают юные,  малодифференцированные, с ядрами, содержащими преи-
    мущественно эухроматин.
         Проведенные радиоавтографические  исследования включения 3Н-тими-
    дина в фибробласты ран показывает,  что уже через 1 сутки имеет  место
    выраженное  различие  во  включении тимидина в ядра фибробластов ткани
    раны. ИМЯ фибробластов контрольных животных составил через 1 час после
    введения тимидина 1,77%  ,  а у животных,  раны которых обрабатывались
    ЭВР,  2,81 + 0,1 %  (Р<0,01). Через 8 часов после введения 3Н-тимидина
    соответственно 1,96 + 0,1 %  и 2,4 + 0,1 %. Наиболее существенные раз-
    личия в ИМЯ фибробластов ран контрольных животных и  обработанных  ЭВР
    отмечались  через  24  часа после введения тимидина.  ИМЯ фибробластов
    контрольных животных составил 2,38 + 0,05 % , а животных, раны которых
    подвергались  обработке ЭВР,  5,53,  то есть ИМЯ фибробластов превысил
    контрольный уровень почти в два раза (рис 2.12). Это свидетельствует о
    том,  что практически все фибробласты, включившие 3Н-тимидин, вступили
    в митоз,что привело у удвоению ИМЯ.  Это может также свидетельствовать
    о появлении за этот период клеток- предшественниц фибробластов с мече-
    ными ядрами.
         Очень высок  уровень  включения 3Н-тимидина в ядра эндотелиальных
    клеток и перицитов капилляров ткани раны (рис 2.14).  Хотя в этот срок
    новообразование капилляров выражено незначительно,  ИМЯ эндотелиальных
    клеток достигает 25-30%.  Довольно выраженные изменения наблюдаются  в
    эпидермисе у края раны.  Уже в первые сутки в базальном слое эпидерми-
    са, несколько отступя от самого края, у животных, раны которых обраба-
    тывались ЭВР,  больше встречаются митозов. Эпителиоциты содержат круп-
    ные ядра с 1-2 ядрышками (рис 2.15),  имеет место акантоз. У контроль-
    ных  животных эти процессы выражены не столь ярко,но у них наблюдается
    акантолиз клеток шиповатого слоя (рис 2.16). Радиоавтографическое исс-
    ледование  включения  3Н-тимидина  в клетки базального слоя эпидермиса
    показало,что через 1 час после введения предшественника ИМЯ  контроль-
    ных животных составил 22,5 + 0,8 %  , у животных, раны которых подвер-
    гались обработке ЭВР,  39,0 + 0,5 %  (рис.  2.13). Через 8 часов после
    введения  3Н-тимидина ИМЯ контрольных и обработанных ЭВР животных сос-
    тавил в клетках базального слоя соответственно 29,3 + 0,2%  и  39,8  +
    0,4%,  в  клетках же шиповатого слоя также встречается небольшое число
    клеток с мечеными ядрами.  ИМЯ у контрольных животных составил 29,0  +
    0,2%  ,  у животных, раны которых обрабатывались ЭВР, 5,1+ 0,1%. Через
    24 часа после введения зН-тимидина ИМЯ  клеток  базального  слоя  края
    составил у контрольных животных 32,8+ 0,3%,  у животных , обработанных
    ЭВР,  40,0+0,6%.  ИМЯ клеток шиповатого слоя соответственно 9,9+0,4% и
    21,5 + 0,5%  (Р 0,01) (Рис.2.13). Это свидетельствует о том, что у жи-
    вотных, раны которых обрабатывались ЭВР, имеет место выраженное усиле-
    ние  включения  3Н-тимидина  в ядра клеток базального слоя эпидермиса.
    Более высокие значения ИМЯ клеток шиповатого слоя указывает, что обра-
    ботка  ран  ЭВР вызывает не только усиление пролиферативной активности
    эпидермиса, но и сопровождается возрастанием темпа миграции клеток.
         Ультраструктурные исследования  показывают,  что  уже в эти сроки
    эпителиальные клетки животных, раны которых обрабатывались ЭВР, содер-
    жат более крупные ядра как в базальном, так и в шиповатом слое.
         На третьи сутки раневого процесса в тканях ран контрольных живот-
    ных доминирующими клетками в поверхностных слоях продолжают оставаться
    ПЯЛ.  Все еще много клеточного детрита  и  фибрина.  Стереометрические
    исследования показали, что наряду с возрастанием относительного объема
    в тканях ран контрольных животных ПЯЛ,  фибробластов  и  макрофагов  и
    особенно объема,  занимаемого микрососудами, имеет место снижение объ-
    ема бесклеточных зон, свободных эритроцитов и жировых клеток. В ранах,
    орошаемых  ЭВР  и  подвергнутых комплексному воздействию,  наблюдается
    снижение объема,  занимаемого ПЯЛ и бесклеточными зонами. В них наряду
    с увеличением объема микрососудов в значительно большей степени, чем в
    контроле, увеличивается объем, занимаемый фибробластами, макрофагами и
    особенно клетками плазматического ряда. Существенно возрастает относи-
    тельный объем эозинофилов и тучных клеток,  уменьшается площадь неэпи-
    телизированной поверхности (таб.2.2.,  рис. 2.17). Среди обломков кле-
    ток встречаются микроорганизмы. Однако в эти сроки они чаще встречают-
    ся не свободно лежащими среди клеток и фибрина,  а поглощенными ПЯЛ  и
    окруженными в их цитоплазме мембранными структурами.  В ранах, обрабо-
    танных ЭВР,  ПЯЛ располагаются плотнее , фибрин практически не опреде-
    ляется.  Фагоцитированные микроорганизмы в цитоплазме ПЯЛ подвергаются
    лизису (Рис.2.18).В 68% случаев контроля имело место нагноения ран . В
    более глубоких слоях были многочисленные клетки фибробластического ря-
    да,  встречались отдельные тучные клетки, эозинофильные лейкоциты, мо-
    ноциты, лимфоциты и малодифференцированные клетки (рис.2.19).Несколько
    увеличивалась пролиферативная активность эндотелиальных клеток.
         В тканях ран, обработанных ЭВР, наряду с ПЯЛ в поверхностных сло-
    ях встречалось довольно много макрофагов (Рис.2.20 ,  содержащих в ци-
    топлазме разнообразные внутриклеточные тельца типа лизосом,  фагоцити-
    рованные обломки клеток. В грануляционной ткани доминирующим клеточным
    типом  были клетки фибробластического ряда в разных стадиях активности
    и функциональной зрелости.  Преобладали ,  однако, зрелые фибробласты.
    Последние характеризовались вытянутой формой с многочисленными отрост-
    ками.  В цитоплазме доминирующими структурами были  профили  зернистой
    эндоплазматической сети, структуры комплекса Гольджи. В зависимости от
    степени зрелости клеток профили зернистой эндоплазматической сети были
    компактными  или растянутыми содержимым умеренной электронной плотнос-
    ти.  Зрелые фибробласты были окружены пучками волокон,  зачастую в во-
    локнах хорошо выражена поперечная исчерченость (Рис.2.21). Фибробласты
    часто контактировали с макрофагами и малодифференцированными клетками.
    В юных фибробластах были крупные ядра с 1-2 ядрышками. В некоторых яд-
    рах преобладал гетерохроматин,  в других - эухроматин.  Часто в цитоп-
    лазме  юных  фибробластов встречались центриоли.  Это указывало на то,
    что в этот срок имеет место активная пролиферация фибробластов.  Облу-
    чение  ран гелий-неоновым лазером также вызывало увеличение числа фиб-
    робластов в тканях и изменение ультраструктуры,  свидетельствующие  об
    активации  внутриклеточных  процессов.  Зрелые  фибробласты  содержали
    большое число профилей  зернистой  эндоплазматической  сети,  структур
    комплекса Гольджи.

                                                     Таблица 2.2.
              ОТНОСИТЕЛЬНЫЙ ОБЪЕМ КЛЕТОК (В%) И БЕЗКЛЕТОЧНЫХ ЗОН
                     В РАНАХ НА 3 СУТКИ ПОСЛЕ ДЕРМАТОМИИ

    ----------------------T------------------------T---------------------
    Тип воздействия       |    Физ.раствор         |        ЭВР
       Тип клеток         |                        |
    ----------------------+------------------------+---------------------
     1. Бесклеточные зоны        31,4+0,70               15,1+1,32
                                                          Р/_0,01
     2. Жировые клетки            4,6+0,83            хх  2,0+0,47
                                                          Р/_0,05
     3. Сосуды в т.ч.            14,8+1,19            хх 19,3+0,75
        эндотелиоциты                                     Р/_0,05
     4. Внесосудистые             6,7+0,87            хх  3,6+0,56
        эритроциты                                        Р/_0,05
     5. ПЯЛ                      14,1+1,12            хх 16,7+0,70
                                                          Р/_0,05
     6. Лимфоциты                 7,2+0,68            хх  3,0+0,56
                                                          Р/_0,05
     7. Фибробласты               7,2+0,61            хх 13,1+0,77
                                                          Р/_0,05
     8. Макрофаги                 3,2+0,51            хх  7,8+0,42
                                                          Р/_0,05
     9. Плазмобласты              1,1+0,31            хх  5,6+0,48
        и плазмоциты                                      Р/_0,05
    10. Эозинофилы                1,6+0,40            хх  5,0+0,58
                                                          Р/_0,05
    11. Лаброциты                 1,7+0,40            хх  4,8+0,55
                                                          Р/_0,05
    12. Моноциты и неэтири-       6,3+1,52            хх  3,6+1,34
        фицированные кислоты                              Р/_0,05
    ---------------------------------------------------------------------
     Примечание: В  случаях,  отмеченных (хх),  использовался критерий
                     знаков

         Проведенные радиоавтографические исследования включения 3Нтимиди-
    на в фибробласты грануляционной ткани ран контрольных крыс,  обрабаты-
    ваемых ЭВР,  подвергнутых облучению гелий-неоновым  лазером,  а  также
    комплексному воздействию ЭВР и лазерному облучению,  показали, что ге-
    лий-неоновый лазер и ЭВР вызывают увеличение включений тимидина в  яд-
    рах.  ИМЯ фибробластов контрольных животных составил 5,5 + 0,4%,  под-
    вергнутых лазерному облучению - 7,0 +-0,4%  (Р 0,05), обработанных ЭВР
    - II,4+0,7%  (Р 0,01), подвергнутых комплексной обработке -10,0 + 0,6%
    (Р 0,01)(Рис.2.22).  ИМЯ фибробластов ран животных, подвергнутой комп-
    лексной  обработке,  несколько ниже ,  чем у обработанных ЭВР.  Однако
    данные планиметрического исследования площади ран показывают,  что за-
    живление у них идет быстрее (Рис.2.3).  Видимо,  пик пролиферации фиб-
    робластов в грануляционной ткани ран животных,  подвергнутой комплекс-
    ной обработке,  наступает раньше, чем у животных, раны которых обраба-
    тывались только ЭВР.
         Наряду с усилением пролиферации фибробластов грануляционной ткани
    у животных, раны которых обрабатывались ЭВР, имеет место усиление про-
    лиферации  эндотелия  сосудов (рис.2.25). ИМЯ эндотелия достигает 60%.
    Крупные эндотелиальные клетки выбухают в  просвет  капилляров,  клетки
    эндотелия содержат большое число свободных полисом,  профили зернистой
    эндоплазматической сети,структуры комплекса Гольджи (Рис.2.26). ядра в
    них крупные, с большими ядрышками, сами клетки выбухают в просвет мик-
    рососудов.  Очень часто наблюдаются различные стадии митозов эндотели-
    альных клеток (Рис.2.27).Их ядра, так же, как и ядра фибробластов, на-
    ходятся в различных функциональных стадиях. Наряду с увеличением вклю-
    чения тимидина в ядра эндотелиальных клеток,  активацией их внутрикле-
    точных структур,  ЭВР вызывает увеличение включения з-Н тимидина в пе-
    рициты.
         ЭВР, лазерное облучение ,  а также их комплексное воздействие вы-
    зывают активацию и других клеток соединительной ткани.  В более глубо-
    ких слоях раны увеличивается содержание тучных клеток и эозинофилов. В
    ранах, обработанных ЭВР, Отмечается усиление выхода секреторных гранул
    тучных клеток (Рис.2.28) и,  особенно, эозинофилов. Эозинофильные гра-
    нулы располагаются в межклеточных пространствах,  особенно часто между
    клетками фибробластического ряда (Рис.2.29, 2.30).
         Комплексное воздействие  на  раны  вызывает активацию и миоцитов,
    прилежащих ко дну раны.  Появляются малодифференцированные миоциты.  В
    их цитоплазме наряду с миофибриллами располагаются свободные полисомы,
    профили  зернистой  эндоплазматической  сети   и   комплекса   Гольджи
    (Рис.2.31).
         ЭВР, лазерное облучение и комплексное воздействие на раны вызыва-
    ет усиленное включение зН-тимидина в эпидермис у края раны. На 3 сутки
    раневого процесса ИМЯ базальных  клеток  эпидермиса  края  раны  равен
    27,8+  0,54%.  При воздействии лазером - 37,5 + 0,8%  (Р 0,01),  ЭВР -
    40,9 + 0,9%  (Р ),01) (рис.  2.23) через Iчас после введения  меченого
    предшественника ДНК особенно много клеток с мечеными ядрами отмечается
    в клетках волосяных мешочков у края раны.
         Как известно, в эпителизации ран важное значение играет так назы-
    ваемый вставочный  рост.  Радиоавторафическое  исследование  включения
    зН-тимидина в клетки базального слоя эпидермиса вдали от края раны по-
    казало, что ЭВР вызывает выраженную активацию этого процесса.
         У контрольных  животных ИМЯ базальных клеток вдали от края раны (
    более 500 клеточных позиций) составил 13,9+- 0,7%,  при лазерном облу-
    чении - 13,7+-0,6%,  при обработке ЭВР - 20,9 +- 0,8%, при комплексном
    воздействии ЛЭР - 20,9 +- 0,7%  (Р 0,01) (Рис.2.23, 2.24).Ультраструк-
    турное исследование эпидермиса показало, что обработка ран ЭВР вызыва-
    ет изменение их ультраструктуры,  заключающееся в увеличении  числа  и
    размеров ядрышек в ядрах клеток базального слоя и шиповатого слоя. Ме-
    нее выражены явления акантолиза.  В клетках шиповатого слоя появляются
    зерна кератогиалина, что является косвенным признаком усиленной диффе-
    ренцировки эпидермиса. Наряду с уменьшением явлений акантолиза эпидер-
    миса имеет место увеличение числа десмосом на плазматических мембранах
    клеток базального и особенно шиповатого слоя,  что способствует  проч-
    ности эпителиального пласта (Рис.2.32).
         На 3 сутки раневого процесса в глубоких слоях ткани раны  появля-
    ются первые плазматические клетки с характерным специфическим свечени-
    ем цитоплазмы при обработке прямым методом Кунса. Причем, если у конт-
    рольных животных эти клетки единичны, то у животных, обработанных ЭВР,
    облученных лазером и особенно при комплексной обработке ЛЭР  они  были
    многочисленны.  Их цитоплазма светится ярче , сами клетки крупнее. Ла-
    зерная обработка раны вызывает усиление свечения цитоплазмы  плазмати-
    ческих клеток. При обработке ран ЭВР отмечается возрастание числа этих
    клеток, а также увеличение интенсивности диффузного свечения ткани ра-
    ны в зоне скопления плазматических клеток  (рис.  2.33).  Видимо,  это
    свидетельствует  об  изменениях  проницаемости  плазматических мембран
    этих клеток под влиянием ЭВР.
         СЭМ показала,  что на третьи сутки дно раны контрольных  животных
    покрыто  бесструктурными массами.  Не определяется наползание эпителия
    от края раны (Рис. 2.34). В ранах животных, облучаемых ГНЛ, от границы
    неповрежденной кожи,  окружающей рану, имеет место наползание эпители-
    ального пласта,  продвигающегося по дну раны,  свободного от  детрита.
    Здесь  определяются  структуры,  образующие петлистый рельеф.  В более
    глубоких участках раны видны крупные фибробласты с отростками и волок-
    нами между ними. Среди волокнистых структур располагаются более мелкие
    клетки округлой или овальной формы.  В ранах,  обработанных ЭВР,  зона
    наползающего на дно раны эпителиального пласта шире. По периферии рас-
    положен выступающий вал, от которого простирается уплощенная зона эпи-
    телия, покрывающая периферийную область раневого дефекта (Рис.  2.35).
    Аналогичная  картина  наблюдается  в ранах,  подвергнутых комплексному
    воздействию ГНЛ и ЭВР.
         Проведенное электронногистохимическое определение аденилатциклазы
    на плазматических мембранах, внутриклеточных структурах эндотелия, эо-
    зинофилов, ПЯЛ и фибробластов. Наблюдалось появление значительного ко-
    личества  продукта  реакции на ядерной оболочке и ядрышках клеток фиб-
    робластического ряда. Видимо, это связано с интенсификацией пролифера-
    тивных процессов фибробластов, увеличением транспорта из ядрышка в ци-
    топлазму (Рис.2.36, 2,37, 2.38, 2.39).
         Биохимические исследования показали,  что обработка ран ЭВР вызы-
    вает достоверное увеличение серотонина и гистамина (Таб. 2.3),что кор-
    релирует с увеличением относительного объема тучных клеток. Наблюдает-
    ся значительное увеличение в грануляционной  ткани  ран,  обработанных
    ЭВР,  цГМФ.  В  контроле содержание цГМФ составило 80+-2,1,  в опыте -
    109+-7 пм/г (Р 0,01)
         В содержании  цАМФ  существенных  отличий в контрольной и опытной
    группах не отмечалось (208+-18 и 207+-8 пМ/г.)
         Через 5 суток после нанесения дерматомных ран созревание грануля-
    ционной ткани и эпителизация лучше всего выражены при комплексной  об-
    работке ран (Рис. 2.40, 2.41). Доминирующими структурами клеток грану-
    ляционной ткани являются фибробласты.  Стереометрический подсчет пока-
    зал,  что они особенно многочисленны в грануляционной ткани ран, обра-
    ботанных ЭВР и подвергнутых комплексному  воздействию.  У  контрольных
    животных  в  ранах  довольно большой объем занимают бесклеточные зоны.
    Объем ПЯЛ снижается как в контроле,  так и в ранах,  подвергнутых воз-
    действию  ГНЛ и ЭВР и комплексной обработке.  В последних значительный
    объем занимают макрофаги и клетки плазматического ряда (Таб. 2.4). На-
    ибольший же объем занимают микрососуды. Фибробласты как и в предыдущие
    сроки находятся в разных стадиях созревания и функциональной активнос-
    ти.
         Воздейсвие ЭВР  вызывает существенное возрастание пролиферативной
    активности фибробластов.  Через I час после введения  зН-тимидина  ИМЯ
    фибробластов контрольных животных составил 6,5+-0,2%, обработанных ЭВР
    - 9,07+-0,3%.  В последующие сроки (8 и 24 часа) после введение мечен-
    ного  предшественника ДНК ИМЯ фибробластов грануляционной ткани дерма-
    томных ран существенно не менялся.

                                                     Таблица 2.3.
             СОДЕРЖАНИЕ СЕРОТОНИНА В КОЖЕ И ТКАНИ РАН (ммоль/мл)

    -------T----------------------------T--------------------------------
    Время  |           Контроль         |            ЭВР
           +--------------T-------------+---------------T----------------
           |     Кожа     | Ткань  ран  |    Кожа       |  Ткань  ран
    -------+--------------+-------------+---------------+----------------
    3 суток    1,624+0,05    1,505+0,01    0,789+0,06       2,073+0,08
       Р                                      <0,01            <0,05
    7 суток    0,324+0,016   0,223+0,0063   0,18+0,007      0,462+0,02
       Р                                      <0,01            <0,01
              Содержание гистомина в коже и ткани ран (ммоль/мл)
    3 суток    1,206+0,016   1,116+0,016   6,642+0,04       4,545+0,03
       Р                        <0,01         <0,01            <0,01
    7 cуток     2,43+0,021    2,04+0,0152   2,16+0,0152     1,686+0,018
       Р                                      <0,01            <0,05
    ---------------------------------------------------------------------

                                                  Таблица 2.4.
           ОТНОСИТЕЛЬНЫЙ ОБЪЕМ КЛЕТОК (В%) В РАНАХ НА 5 СУТКИ ПОСЛЕ
                                  ДЕРМАТОМИИ

    ------------------T-----------------------T--------------------------
    Вид воздействия   |   Физ. раствор        |          ЭВР
       Тип клеток     |                       |
    ------------------+-----------------------+--------------------------
     1. Бесклеточные        20,1+0,91               хх  9,7+0,84
        зоны                                            Р/_0,05

     2. Жировые клетки       4,5+0,50               хх  1,1+0,31
                                                        Р/_0,05

     3. Сосуды в т.ч.       18,1+0,80                  20,8+0,88
        эндотелиоциты                                   Р/_0,05

     4. Внесосудистые        2,0+0,47                х  0,2+0,13
        эритроциты                                      Р/_0,01

     5. ПЯЛ                 14,0+0,94                  13,1+0,80
                                                        Р/_0,05

     6. Лимфоциты            7,0+0,57              хх   8,2+0,65
                                                        Р/_0,05

     7. Фибробласты         12,3+0,62              хх  17,7+0,63
                                                        Р/_0,05

     8. Макрофаги            6,1+0,43                  13,1+0,94

     9. Плазмобласты и       3,3+0,47              хх   5,5+0,56
        плазмоциты                                      Р/_0,05

    10. Эозинофилы           2,5+0,34              хх   5,7+0,56
                                                        Р/_0,05

    11. Лаброциты            2,4+0,52              хх   4,0+0,49
                                                        Р/_0,05

    12. Моноциты и неэтери-  7,7+1,14              хх   2,9+0,66
        фицированные кислоты                            Р/_0,05
    ---------------------------------------------------------------------

         Примечание: В случаях, отмеченных (х), критерий Стьюдента исполь-
               зовался для оценки отличий от нуля средней разности в парах
                     В случаях,  отмеченных  (хх),  использовался критерий
               знаков.

         ЭВР вызывает увеличение содержания в фибробласт х внутриклеточных
    структур,  непосредственно связанных с синтезом коллагена. Фибробласты
    грануляционной ткани ран ,  обработанных ЭВР,  содержали более крупные
    ядрышки, в них была лучше развита зернистая эндоплазматическая сеть.
         ЭВР способствует  усилению  пролиферации эндотелия,  что вызывает
    увеличение образования капилляров.  Эндотелиальные  клетки  интенсивно
    включают  зН-тимидин.  Они  крупнее  чем  у контрольных животных,  под
    электронным микроскопом часто наблюдается митотическое деление эндоте-
    лия и "почкование" капилляров.
         Наряду с возрастанием пролиферативных процессов в  соединительной
    (грануляционной) ткани ЭВР вызывает увеличение пролиферации эндотелия.
    ИМЯ клеток базального слоя у края раны на 5 сутки составил в  контроле
    30,0+-0,1%, у обработанных ЭВР животных - 49,9+-0,4%. Возрос и ИМЯ ба-
    зального слоя эпидермиса. Вдали от края раны он составил соответствен-
    но 14,6+-0,2%  и 20,1+-0,1%.  Через 8 часов ИМЯ клеток базального слоя
    эпидермиса был у контрольных животных равен 38,3+-0,1%, у обработанных
    ЭВР - 49,4+- 0,2%  у края раны и 21,1+-0,2%  в контроле и 35,4+-0,5% у
    обработанных ЭВР животных вдали от края (Р 0,01).  Если  через  1  час
    после  введения  зН-тимидина в шиповатом слое клеток с мечеными ядрами
    ИМЯ не определялось,  то через 8 часов он составил у края  раны  конт-
    рольных животных 5,3+-0,2%,  у обработанных ЭВР - 6,8+-0,2%,  вдали от
    края соответственно 2,3+-0,1%.  Таким образом,  имело место увеличение
    пролиферации клеток как у края раны, так и отступя от него, что свиде-
    тельствует о стимулирующем влиянии ЭВР на вставочный  рост  кожи.  ИМЯ
    фибробластов  через 8 часов после введения зН-тимидина составил в гра-
    нуляционной ткани контрольных животных 6,0+-0,1%,  у животных  ,  раны
    которых  обрабатывались ЭВР,  9,6+-0,2%.  Через 24 часа после введения
    тимидина,  меченного тритием,  ИМЯ клеток базального  слоя  эпидермиса
    края раны был равен 31,7+-0,2%  в контроле и 49,3+-0,1%  у эксперимен-
    тальных животных.  Вдали от  края  раны  соответственно  12,7+-0,2%  и
    20,4+-0,3%. ИМЯ клеток шиповатого слоя края раны был у контрольных жи-
    вотных равен 6,8+_0,2%,  у обработанных ЭВР - 21,0+-0,2%  а  вдали  от
    края раны соответственно 4,5+-0,1% и 6,8+-0,2%
         ИМЯ фибробластов был в контроле равен  5,4+-0,1%,  у  эксперимен-
    тальных животных - 9,44+-0,2% (P< 0,01).
         Эти исследования свидетельствуют ,  что ЭВР  вызывает  увеличение
    пролиферативной активности как фибробластов, так и эпидермиса. Причем,
    увеличение пролиферации эпидермиса сопровождается возрастанием и темпа
    его  миграции.  ЭВР вызывает отчетливое увеличение и вставочного роста
    кожи.
         Сравнительное радиографическое исследование включения зН-тимидина
    в фибробласты грануляционной ткани ран и эпидермиса у края раны при их
    обработке ЭАВР, ГНЛ и комплексной ЛЭР обработке показало, что наиболее
    благоприятный эффект оказывает на раны комплексное воздействие  ГНЛ  и
    ЭВР.
         На 5 сутки раневого процесса ИМЯ фибробластов контрольных  живот-
    ных, раны которых облучались красным, составил 7,6+-0,5%, у облучаемых
    ГНЛ - 8,6+-0,4% (Р<0<1), у обработанных ЭВР - 11,4+-0,8% (Р<0,01), при
    комплексной  обработке  - 9,4+_0,5%.  ИМЯ эпидермиса у края раны конт-
    рольных животных составил 30,3+1,1%  при  облучении  ГНЛ  -  39,9+1,0%
    (Р<0,01),  обработанных ЭВР - 41,3+0,4% (Р<0,01), при комплексном воз-
    действии ЛАР - 42,8+0,9%  (P<0,01).  Вдали от края раны соответственно
    15,2+0,6%, 16,0+0,6% (P<0,01), 21,2+0,8% (P<0,01), 21,5+0,8% (P<),01).
    Эти данные показывают, что лазерное облучение стимулирует пролиферацию
    эпидермиса у края раны, а ЭВР - как у края раны, так и вставочный рост
    кожи.
         Электронномикроскопическое исследование ткани ран в этот срок по-
    казывает,  что воздействие ЭВР, ГНЛ и комплексное ЛЭР воздействие соп-
    ровождается  изменением  структур эпителиальных и соединительнотканных
    клеток, свидетельствующим об их активации. Хотя 3 и 5 сутки характери-
    зуются  максимальной пролиферативной активностью фибробластов в грану-
    ляционной ткани ран у животных,  обработанных ЭВР, на 5 сутки преобла-
    дают фибробласты, ультраструктура которых свидетельствует об интенсив-
    ном белковом синтезе.  Они содержат большое число  профилей  зернистой
    эндоплазматической сети, как правило, содержащих умеренно электронноп-
    лотный материал,  хорошо  развитых  комплекс  Гольджи.  Плазматическая
    мембрана клеток тесно контактирует с волокнистыми структурами,  распо-
    лагающимися во внеклеточном пространстве. Изредка в клетках встречают-
    ся миелиноподобные структуры.
         Проведеные исследования  включения  зН-пролина  в  грануляционную
    ткань раны,  орошаемой ЭВР, с помощью электронномикроскопической ради-
    оавтографии показали,  через 1 час после введения  этой  аминокислоты,
    являющейся основным компонентом коллагена,  метка локализуется главным
    образом над коллагеновыми волокнами. Небольшая часть автографов распо-
    лагается  над цитоплазмой фибробластов,  и единичные треки встречаются
    над тучными клетками. Эти исследования указывают на то, что имеет мес-
    то  ускорение  синтеза  коллагена.  В ранах контрольных животных в эти
    сроки основная часть клеток располагается над  цитоплазмой  фиброблас-
    тов. Наряду с фибробластами, активно синтезирующими коллаген, в грану-
    ляционной ткани раны определяются клетки  вытянутой  формы  с  большим
    числом  полисом  в  цитоплазме,  находящиеся в различных стадиях мито-
    за.Возможно, что это делящиеся недифференцированные фибробласты.
         Воздействие ЭВР,  ГНЛ  и ЛЭР вызывает и изменения ультраструктуры
    эндотелиальных клеток,  также указывающие на активацию в них процессов
    аутосинтеза.  Крупные эндотелиальные клетки, выступающие в просвет со-
    судов,  содержат в цитоплазме большое число полисом, отдельные профили
    зернистой эндоплазматической сети и комплекса Гольджи. Так же, как и в
    предыдущие сроки, часто наблюдаются митозы эндотелиоцитов. Электронно-
    микроскопически в них не определяются пиноцитозные везикулы.
         В тучных клетках и эозинофилах увеличен выход секреторных  гранул
    из клетки в межклеточную чреду.
         В поверхностных слоях раны контрольных животных число ПЯЛ доволь-
    но велико. У крыс, раны которых обрабатывались ЭВР, облучались ГНЛ или
    подвергались комплексной обработке ЛЭР, в поверхностных слоях встреча-
    ются преимущественно макрофаги, фагоцитирующие как обломки клеток, так
    и нейтрофильные лейкоциты. Макрофаги, ультраструктурная характеристика
    которых  свидетельствует о высокой фагоцитарной активности,встречаются
    и в более глубоких слоях раны.
         Планиметрические исследования показали,что на 5 сутки после нане-
    сения дерматомных ран площадью 0,95 см2 и 7,2 см2 имеет место выражен-
    ное  ускорение  эпителизации  раневого дефекта как в группе облученных
    ГНЛ,  подвергнутых воздействию ЭВР,  так и особенно комплексному  воз-
    действию (рис 2.2, 2.3).
         Проведенные на 5 сутки биохимическое определение содержания  цик-
    лических нуклеотидов в ткани ран показало,что цГМФ в ранах,  орошаемых
    ЭВР,несколько ниже,чем в контроле и значительно ниже,,чем в предыдущий
    срок  и  составило 14,0 +- 0,6 и 9+-1,4 мм2.  Это,  видимо,обусловлено
    снижением пролиферативной  активности  фибробластов  в  грануляционной
    ткани ран, орошаемых ЭВР.
         На 7 сутки в ранах,подвергнутых обработке ЭВР и комплексному воз-
    действию ЛЭР,  происходит их эпителизация. Доминирующими клетками гра-
    нуляционной ткани продолжает оставаться фибролбласты и макрофаги.  Од-
    нако в ранах,  облучаемых ГНЛ, орошаемых ЭВР и подвергнутых комлексной
    обработке,отмечается тенденция к уменьшению, по сравнению с предыдущим
    сроком объема,занимаемого этими клетками.  Так,  объем фибробластов  в
    ранах,  подвергнутых  комплексной  обработке,уменьшился с 21%  до 16%.
    Значителен объем,  занимаемой клетками плазматического ряда.Доминирую-
    щими структурами грануляционной ткани продолжают оставаться микрососу-
    ды.  Причем их объем как в ранах контрольных животных,так и подвергну-
    тых действию ГНЛ, ЭВР и комплексной обработке, практически одинаков. В
    двух последних группах ран возрастает объем,  занимаемый бесклеточными
    зонами.Это  связано  с  возрастанием  числа волокнистых структур (таб.
    2.6.).

                                                   Таблица 2.5.
    ------T---------------------------T----------------------------------
    Время |Содержание белка мг/г ткани|Включение Н3-пролина в кмк/мин на
          |                           |    мг белка
          +-------------T-------------+-----------------T----------------
          |  Контроль   |Обработка ЭВР|   Контроль      |Обработка ЭВР
          +------T------+------T------+--------T--------+-------T--------
          |Грану-| Кожа |Грану-| Кожа |Грануля-| Кожа   |Гранул.|Кожа во-
          |ляц.  |вокруг| ляц. |вокруг|ционная | вокруг | ткань |круг ра-
          |ткань | раны |ткань | раны |ткань   | раны   |       |  ны
    ------+------+------+------+------+--------+--------+-------+--------
    3суток  300+   298+   312+   282+    265+    348+     386+     330+
            7,4    14,7   4,4    18      12,9     73       19       58
      Р                   <0,1   <0,1                     <0,01    <0,01

    7cуток  280+   196+   357+   308+    86,66+  178+    155,75+   142+
            9,12   7,45   8,5    6,80    29,64   55,5     12,3     9,4
      р                   <0,01  <0,01                    <0,01    <0,01
    ---------------------------------------------------------------------

                                                     Таблица 2.6.
               ОТНОСИТЕЛЬНЫЙ ОБЪЕМ КЛЕТОК (В %) В ПОВЕРХНОСТНЫХ
                    СЛОЯХ РАН НА 10 СУТКИ ПОСЛЕ ДЕРМАТОМИИ

    --------------------T-----------------------T------------------------
    Вид воздействия     |   Физ. раствор        |         ЭВР
       Тип клеток       |                       |
    --------------------+-----------------------+------------------------
     1. Бесклеточные зоны      5,5+0,65                 15,1+0,81
                                                         Р/_0,05
     2. Жировые клетки            0                         0
     3. Сосуды в т.ч.         22,6+0,86                 22,2+0,57
        эндотелиоциты                                    Р/_0,1
     4. Внесосуд.эритроциты       0                         0
     5. ПЯЛ                    6,8+0,63              хх  1,6+0,37
                                                         Р/_0,05
     6. Лимфоциты              7,9+0,5               хх 11,4+0,9
                                                         Р/_0,05
     7. Фибробласты           14,7+0,51               х 16,8+0,44
                                                         Р/_0,1
     8. Макрофаги              9,5+0,62               х 10,6+0,50
                                                         Р/_0,05
     9. Плазмобласты и         6,6+0,62               х  7,5+0,70
        плазмоциты                                       Р/_0,05
    10. Эозинофилы             6,0+0,54               х  7,2+0,36
                                                         Р/_0,05
    11. Лаброциты              4,2+0,61                  6,8+9,39
                                                         Р/_0,05
    12. Моноциты и неэте-     16,2+1,70              хх  1,4+0,37
        рифицированные к-ты                              Р/_0,05
    ---------------------------------------------------------------------

         Примечание: В случаях, отмеченных (х), критерий Стьюдента исполь-
               зовался для оценки отличий от нуля средней разности в парах
                     В случаях,  отмеченных  (х),  использовался  критерий
               знаков.

         На 7 сутки снижается ИМЯ фибробластов ран.  Особенно снижение  ИМ
    фибробластов в ранах,  обрабатываемых ЭВР. Так, у контрольных животных
    ИМЯ составили 7,0 + 0,6 %  ,  у  подвергнутых  лазерному  облучению  -
    8,1+0,4 %,а у обработанных ЭВР4,8+0,6 (Р< 0,05)(рис.2.22).  Это сопро-
    вождается уменьшением включения 3Н-тимидина в ядра эндотелия  микросо-
    судов грануляционной ткани и перициты.
         ИМЯ эпидермиса как у контрольных,так  и  у  животных,подвергнутых
    лазерному излучению,обработке ЭВР и комплексному воздействию,продолжал
    оставаться довольно высоким.Он составил соответственно  16,2  +  0,7%,
    17,1 + 0,5%, 20,9+0,2%, (Р<0,01), 20,2+-0,8%,(Р< 0,01) (рис.2.23).
         Электронномикроскопические исследования показали,что в эти  сроки
    в  ранах  преобладают  зрелые фибробласты и клетки типа фиброцитов.Они
    окружены довольно мощными пластами волокон,  зачастую с выраженной по-
    перечной  исчерченностью.  Довольно  многочисленны фибробласты и клет-
    ки,которые по своей форме и ультраструктурными  признакам  -  развитию
    зернистой  эндоплазматической сети,  комплекса Гольджи можно отнести к
    клеткам фибробластичекого ряда. Они содержат в цитоплазме значительное
    число образований типа фагосом.  Иногда во внутриплазматических вакуо-
    лях можно различить  коллагеновые  волокна.Возможно,  что  эти  клетки
    представляют собой клетки типа фиброкластов, которые в этот период ра-
    невого процесса принимают участие в резорбции и  перестройке  соедини-
    тельнотканного рубца.
         Стереометрическое определение относительного объема,  занимаемого
    в  поверхностных слоях ран различными типами клеток,показало,что через
    10 суток домирующим типом клеток раны являются фибробласты и  макрофа-
    ги.  В  ранах,  подвергнутых  комплексной обработке,объем фибробластов
    снижается,  количество же макрофагов возрастает.  В ранах  контрольных
    животных увеличивается объем, занимаемой лимфоцитами. У крыс, раны ко-
    торых обрабатывались ЭВР и подвергались комплексному воздействию, наб-
    людается дальнейшее снижение лимфоцитов.Увеличение объема бесклеточных
    зон в ранах, облучаемых ГНЛ, орошаемых ЭВР и подвергаемых комплексному
    воздействию, связано с увеличением волокнистых структур. (таб. 2.6.).

                                                         Таблица 2.7.
           ОТНОСИТЕЛЬНЫЙ ОБЪЕМ КЛЕТОК (В %) ПОВЕРХНОСТНЫХ СЛОЕВ РАН
                         НА 10 СУТКИ ПОСЛЕ ДЕРМАТОМИИ

    ----------------------T----------------------T-----------------------
    Вид воздействия       |     Физ. раствор     |       ЭВР
       Тип клеток         |                      |
    ----------------------+----------------------+-----------------------
     1. Бесклеточные зоны        12,7+0,65             18,4+0,56
                                                        Р/_0,05
     2. Жировые клетки               0                     0
     3. Сосуды в т.ч.            21,3+0,54             18,9+0,87
        эндотелий                                       Р/_0,05
     4. Внесосудистые
        эритроциты                   0                     0
     5. ПЯЛ                       1,0+0,34           х  0,0+0,00
                                                        Р/_0,05
     6. Лимфоциты                10,8+0,41           х  8,5+0,34
                                                        Р/_0,05
     7. Фибробласты              16,9+0,63             16,5+0,47
                                                        Р/_0,1
     8. Макрофаги                10,9+0,58             11,7+0,58
                                                        Р/_0,1
     9. Плазмобласты и            8,3+0,44           х  8,8+0,47
        плазмоциты                                      Р/_0,1
    10. Эозинофилы                7,5+0,31           х  8,4+0,44
                                                        Р/_0,05
    11. Лаброциты                 6,0+0,37           х  6,5+0,47
                                                        Р/_0,1
    12. Моноциты и неэтериф.      4,2+0,83          хх  2,1+0,44
        кислоты                                         Р/_0,05
    ---------------------------------------------------------------------

         Примечание: В случаях, отмеченных (х), критерий Стьюдента исполь-
               зовался для оценки отличий от нуля средней разности в парах
         В случаях,  отмеченных  (хх)  использовался  критерий знаков.

         На 10  сутки  после нанесения дерматомных ран диаметром 0,95см2 у
    крыс,  обработанных ЭВР и подвергнутых комплексному  воздействию,имеет
    место почти полная эпителизация раневой поверхности. У контрольных жи-
    вотных она составила 0,64 + 0,04 (при исходном 0,95 см2), обработанных
    ЭВР  -  0,14 + 0,01 ,  облученных ГНЛ - 0,18 + 0,1 ,подвергнутых комп-
    лексной обработке - 0,12 + 0,04 см2 (рис 2.1).
         В рубцовой ткани преобладали фиброциты и макрофаги. Последние на-
    ходятся в тесном контакте с коллагеновыми волокнами. В некоторых ваку-
    олях, содержащихся в цитоплазме макрофагов , определяются остатки кол-
    лагеновых волокон.
         В эпидермисе ран,  обработанных ЭВР и особенно подвергнутых комп-
    лексному воздействию ГНЛ и ЭВР, на плазматических мембранах клеток ши-
    поватого слоя определяется довольно много десмосом.  В цитоплазме кле-
    ток большое число тонофиламентов.
         На 14  сутки раны с исходной площадью 0,95 см2 полностью эпители-
    зировались как в случае обработки ЭВР, облучения ГНЛ, так и подвергну-
    тые  комплексному воздействию .  Значительно сократилась и площадь ран
    исходных размеров 7,2 см2.  При этом наименьшие  размеры  имели  раны,
    подвергнутые комплексному воздействию. Их площадь была почти в два ра-
    за меньше , чем в ранах контрольной группы.
         В тканях ран в эти сроки также доминирующими клетками были фибро-
    циты.  Довольно часто встречались макрофаги с большим числом  разнооб-
    разных телец в цитоплазме и зонами, содержащими коллагеновые волокна.
         Наряду с исследованиями дерматомных ран проведено также  изучение
    влияния ЭВР,  ГНЛ и ЛЭР (комплексной обработки электронно-активирован-
    ной водой-лазером) на заживление линейных хирургических ран. В отличие
    от дерматомных ран, представляющих собой модель заживления ран вторич-
    ным натяжением,  хирургические линейные паны  заживают,  как  правило,
    первичным натяжением.
         В ранние сроки наблюдения в области разреза встречаются  мигриро-
    вавшие клетки элементы, главным образом нейтрофильные лейкоциты и лим-
    фоциты.  У контрольных животных в  области  раневого  канала  довольно
    большое  количество  прядей фибрина и клеточного детрита.  У животных,
    подвергнутых обработке ЭВР,  ГНЛ и комплексному воздействию,  встреча-
    лись отдельные макрофаги, ПЯЛ, довольно много гликогена (рис.58).
         Проведенные радиографические исследования включения зН-тимидина в
    фибробласты  в  области раневого канала и близлежащих базальных клеток
    эпидермиса показали,  что ЭВР вызывает существенное увеличение ИМЯ как
    фибробластов,  так и эпидермиса. Облучение линейных ран гелий-неоновым
    лазером также вызывает заметное возрастание пролиферативной активности
    фибробластов и эпидермиса у краев раневого канала.  Так, через 3 суток
    после нанесения линейной раны ИМЯ фибробластов составил 2,1+0,3% у жи-
    вотных, раны которых орошались физиологическим раствором. У крыс, раны
    которых обрабатывались ЭВР,  ИМЯ был равен 7,2+0,4%  (Р<0,01). ИМЯ ба-
    зальных  клеток  слоя  эпидермиса соответственно составил 17,6+0,9%  и
    27,1+0,6%  (P<0.01).  ИМЯ фибробластов ран,  облучаемых красным светом
    (контрольная  группа),  составил  2,8+0,3%,  а  при  облучении  ГНЛ  -
    5,9+0,4%  (P<0,01). Имя базальных клеток эпидермиса составил соответс-
    твенно 19,8+0,7%  и 24,3+0,4%  (P<0,01). При комплексной обработке ли-
    нейных ран ЭВР с последующим облучением ГНЛ ИМЯ фибробластов  составил
    7,9+-0,3% (Р<0,01), а эпидермиса - 27,8+0,5% (Р<0,01).
         Через 6 суток после нанесения раны ИМЯ фибробластов при обработке
    раны  физиологическим  раствором  составил  4,7+0,4%  ЭВР  -  8,0+0,5%
    (P<0,01),  при облучении красным светом -  5,6+0,3%,  ГНЛ  -  6,9+0,6%
    (P<0,05) и комплексной обработке ЛЭР - 9,6+0,5%  (P<0,01),  эпидермиса
    соответственно 19,4+0,7%,  21,2+0,4, 20,4+0,5% (Р<0,05) . Через 10 су-
    ток ИМЯ фибробластов ран,  обработанных физиологическим раствором, был
    равен 4,1+0,5%,  ЭВР - 8,0+0,4%  (Р<0,01), красным светом - 3,9+0,3% и
    после  комплексной  обработке ЛЭР - 2,3+ 0,2%,  а эпидермиса соответс-
    твенно 12,0+0,6%,  10,6+0,3% (P<0,05), 7,9+0,4% (P<0,01). Через 14 су-
    ток  ИМЯ фибробластов был у контроьных животных,  4,0+0,5%,  орошаемых
    ЭВР - 2,4+0,4%  (P<0,05),  облучаемых ГНЛ - 2,5+0,3%  (P<0,05) и ЛЭР -
    1,6+0,2% (P<0,01), эпидермиса соответственно 10,1+0,6%, 8,7+0,4%, 6,6+
    0,4 (P<0,01) (рис.2.60).
         На 6  сутки в линейных ранах контрольных животных имеет место на-
    ползание эпителиального пласта на рубец, но полной его эпителизации не
    отмечается.  В ткани рубца многочисленные крупные образования типа ва-
    куолей, встречаются гигантские клетки инородных тел (рис.2.61).
         При облучении ГНЛ отмечается полная эпителизация раны несколькими
    рядами эпителиальных клеток, но со слабо выраженными процессами орого-
    вения.  В рубцовой ткани также встречаются вакуоли и гигантские клетки
    инородных тел. В ранах , орошаемых ЭВР, место рубца покрыто многослой-
    ным  эпидермисом  с  выраженными явлениями кератинизации в клетках по-
    верхностного слоя. От базального слоя клеток в рубцовую ткань выступа-
    ют тяжи клеток,  возможно, представляющие собой формирующиеся придатки
    кожи. В то же время у контрольных животных ,а также у крыс, облучаемых
    ГНЛ, рубцовая ткань не содержит структур, свойственных придаткам кожи.
         Электронномикроскопические исследования показали,  что  ультраст-
    руктурные изменения фибробластов ран,  подвергнутых обработке ЭВР, ГНЛ
    и комплексному воздействию, схожи с таковыми у фибробластов грануляци-
    онной ткани дерматомных ран. Гелий-неоновый лазер, наряду с увеличени-
    ем пролиферативной активности фибробластов,  вызывает возрастание в их
    цитоплазме профилей зернистой эндоплазматической сети,  структур комп-
    лекса Гольджи. Уже в ранние сроки наблюдения (3 суток) в области ране-
    вого  канала  преобладающим типом фибробластов являются зрелые фиброб-
    ласты с ультраструктурными признаками активного гетеросинтеза.
         В еще  большей степени это выражено при обработке ран ЭВР и осо-
    бенно при комплексном воздействии ЭВР и лазера. В цитоплазме большинс-
    тва  фибробластов  многочисленные профили зернистой эндоплазматической
    сети расширены,  в них определяется содержимое  умеренной  электронной
    плотности,  клетки с многочисленными отростками и неровностями плазма-
    тической мембраны.  Отмечается тесный контакт волокон с плазматической
    мембраной  клеток.  Ядра  фибробластов находятся в различных структур-
    но-функциональных состояниях.  В одних ядрах преобладает  гетерохрома-
    тин, в других - эухроматин, равномерно расположенный по кариоплазме. В
    области раневого канала имеется довольно  много  микрососудов.  Многие
    ядра  эндотелиальных клеток интенсивно включают зН-тимидин.  Ультраст-
    руктура цитоплазмы эндотелиальных клеток свидетельствует об  интенсив-
    ности  аутосинтеза.  В них многочисленные полисомы,  отдельные профили
    зернистой эндоплазматической сети и структур комплекса Гольджи.
         В ранах животных,  орошаемых ЭВР и подвергнутых комплексной обра-
    ботке, в эти сроки встречаются ПЯЛ, имеющие ультраструктурные признаки
    активации  функции.  Наблюдается выход их секреторных гранул в межкле-
    точное пространство. Здесь они располагаются свободно среди нежных во-
    локон типа коллагеновых. В цитоплазме ПЯЛ отчетливо определяется комп-
    лекс Гольджи и многочисленные гранулы гликогена.  Комплекс  Гольджи  в
    ПЯЛ контрольных животных встречается чрезвычайно редко. Его практичес-
    ки трудно наблюдать в циркулирующих ПЯЛ.
         В краях ран, орошаемых ЭВР, многочисленны зрелые, активно синте-
    зирующие коллаген фибробласты, контактирующие с тучными клетками и эо-
    зинофилами. В миоцитах, прилежащих к ране, встречаются структуры комп-
    лекса Гольджи, свободные полисомы.
         На 5 сутки нанесения раны у контрольных животных встречается зна-
    чительное число зрелых, активно синтезирующих коллаген фибробластов. В
    ранах животных,  обработанных ЭВР, облученных ГНЛ и подвергнутых комп-
    лексному воздействию ЛАР,  зрелые, активно синтезирующие коллаген фиб-
    робласты являются доминирующими соединительнотканными клетками. Однако
    довольно многочисленны макрофаги ,  тучные клетки и эозинофилы. Макро-
    фаги обладают ультраструктурными признаками,  свидетельствующем об ак-
    тивном фагоцитозе. Плазматическая мембрана образует многочисленные вы-
    росты  и  инвагинации,  в цитоплазме большое число фагосом,  отдельные
    профили гранулярной эндоплазматической сети и структур комплекса Голь-
    джи.
         На 7-10 сутки у контрольных животных все еще довольно велико чис-
    ло зрелых, активно синтезирующих коллаген фибробластов. В то время как
    у животных,  раны которых обрабатывались ЭВР, ГНЛ и подвергались комп-
    лексному воздействию, такие фибробласты практически не встречаются , а
    доминируют клетки типа фиброцитов,  располагающиеся среди пучков воло-
    кон.
         Довольно часто встречаются клетки типа фибробластов, в цитоплазме
    которых  имеются вакуоли с наличием в них волокон,  имеющих поперечную
    исчерченность.
         На 14  сутки  у  животных,  раны которых подвергались воздействию
    ЭВР,  ГНЛ и ЛАР, зона рубца практически не определялась. У контрольных
    животных  в этой области доминируют фиброциты и клетки типа фиброблас-
    тов (рис. 2.63).
         Одним из  наиболее объективных критериев оценки заживления линей-
    ных ран наряду с морфологическими  наблюдениями  является  определение
    прочности  рубца  с помощью тензиометрических исследований.Проведенные
    нами тензиометричекие исследования линейных ран показали,что обработка
    их  ЭВР,  гелий-неоновым лазером и комплексное воздействие существенно
    увеличивают прочность рубца на разрыв.  Различия  в  тензиометрических
    показателях  наиболее  ярко выражены через 5 и особенно 10 суток после
    нанесения линейных ран.При этом отмечено,что наиболее  выраженный  эф-
    фект  дает комплексное применение ЭАВР и гелий-неонового лазерного об-
    лучения.Максимального значения тензиометрические показатели  у  живот-
    ных,раны которых обрабатывались ЭВР,  ГНЛ,и ЛАР, достигают на 10 сутки
    (рис 2.64).
         В этот  срок  они  наиболее  существенно  отличаются от таковых у
    контрольных животных.Однако в дальнейшем имеет место снижения прочнос-
    ти  рубца  у  животных,  подвергнутые комплексному воздействию (ЛАР) и
    особенно обрабатываемых ЭВР.  В то же время облучения линейных ран ГНЛ
    вызывает дальнейшее возрастание прочности рубца. Снижение тензиометри-
    ческих показателей к 14 суткам, видимо,связано, с активацией процессов
    перестройки(ремоделирование) рубца.  Как показывает элетронномикроско-
    пические исследования,у животных,  раны которых подвергались обработке
    ЭАВР  и комплексному воздействию,увеличивается число иакрофагов и фиб-
    робластов. Ультроструктура этих клеток свидетельствует об активации их
    специфической функции.
         Таким образом,проведеннные исследования влияния  орошения  кожных
    ран ЭВР свидетельствует,  что обработанный методом униполярной актива-
    ции водный раствор (католит) способствует ускорению заживления ран.При
    этом  пролиферация  фибробластов  и  эпидермиса возрастает в 1,5 раза.
    Состояния внутриклеточных структур фибробластов свидетельствует об  их
    активации под воздействием ЭВР.Это подтверждается и увеличением уровня
    включения 3Н-пролина в грануляционную ткань  под  влиянием  ЭВР.Уже  в
    ранние  сроки  орошения  имеет  место уменьшенин объема бесструктурных
    зон,увеличение числа клеток,способствующих интенсификации хода ранево-
    го процесса. Увеличение числа ПЯЛ м макрофагов в ранах, обрабатываемых
    ЭВР, и ультраструктурные изменения этих клеток свидельствуют об интен-
    сификации фагоцитарной функции как ПЯЛ,так и макрофагов. В более позд-
    ние сроки имеет место возрастание числа плазматических клеток.Наблюде-
    ния  показали,что  обработка ран ЭВР вызывает активацию и других типов
    клеток,  связанных с раневым процессом.Возрастает объем и эозинофилов,
    тучных  клеток.Это сопровождается увеличением содержания в тканях ран,
    обработанных ЭВР серотонина и гистамина.  Ультраструктурные  изменения
    этих  клеток,а также эндотелиоцитов свидетельствуют об интенсификации,
    под действием ЭВР, специфической функции этих клеток.Увеличение интен-
    сивности  реакции  на  аденилатциклазу  свидетельствует  об  активации
    транспортных процессов через плазматические мембраны.
         Проведенные исследования показали,что облучения ран ГНЛ также вы-
    зывает ускорение их заживления.  При этом морфологические основы биос-
    тимулирующего  действия ЭВР и ГНЛ стереотипны.При комплексном примене-
    нии орошения ран ЭВР и облучения их ГНЛ их  биостимулирующее  действие
    потенцируется,что проявляется в более высоких темпах заживления ран.
         Основное отличие действия ЭВР и ГНЛ на заживления ран заключается
    в том, что ЭВР стимулирует вставочный рост кожи, при облучении ран ГНЛ
    этого не отмечается.

Дом. | Главная | Отзывы